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t细胞的免疫学标记(简述T细胞功能测定的常用方法)

来源:互联网 作者: 人气:0 发布时间:2021-12-23 08:56:22
简述T细胞功能测定的常用方法 博凌科为解答:免疫细胞化学技术是用已知的抗体检测组织与细胞中相应抗原的方法,但抗原抗体相结合的复合物在显微镜下是看不见 的,必须用特殊的标

简述T细胞功能测定的常用方法

博凌科为解答:免疫细胞化学技术是用已知的抗体检测组织与细胞中相应抗原的方法,但抗原抗体相结合的复合物在显微镜下是看不见 的,必须用特殊的标记物对抗体或抗原抗体复合物进行标记,才能使抗原抗体复合物在显微镜下具有可见性

常用的标记物有以下几种:⑴ 荧光素 用荧光素标记已知 抗体,再与组织或细胞中的相应抗原结合,在荧光显微镜下检测荧光素所发荧光,便可知抗原的分布部位,常用的荧光素有绿色 荧光的异硫氰酸荧光素和红色荧光的罗达明B200等

⑵ 酶 用酶标记已知抗体,再 与组织或细胞中的相应抗原结合,利用酶细胞化学方法显示该标记酶以达到显示抗原的目的

常用的标记酶如辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase)与其底物H2O2和 氨基联苯胺相遇时,形成的棕色沉淀可在光镜下观察到,遇锇酸反应后形成锇黑电镜下呈高电子密度

⑶ 胶体金 将 胶体金与抗体结合形成金标记抗体,再与相应的抗原结合,形成显微镜下可见的电子致密的金颗粒

常用的胶体金颗粒直径为5~60nm

⑷ 亲和物质 亲 和物质是一种有多价能力的物质,不仅与另一种亲和物质有高度的亲和力,而且可与抗体蛋白及各种标记物如荧光素、酶、胶体金等结合,因而可以通过荧光显微镜、酶加底物显色反应等定位某种特异分子

常用的亲和物质系统有生物素-亲和素系统、葡萄球菌A蛋白-免疫球蛋白系统

⑸ 铁蛋白 将 铁蛋白通过一种低分子的双功能试剂与抗体相结合,它既保留了抗体的免疫活性又具有显微镜下可见的高电子密度核心

免疫细胞化学技术常用的标记物有哪些?

T细胞的细胞膜上有许多不同的标志,主要是表面抗原和表面受体.这些表面标志都是结合在细胞膜上的巨蛋白分子.

严格的来说T细胞有很多种,如辅助性T细胞,抑制性T细胞,还有常见的效应T细胞.它们的功能都不一样.

辅助性T细胞,具有协助体液免疫和细胞免疫的功能;

抑制性T细胞,具有抑制细胞免疫及体液免疫的功能;

效应T细胞,具有释放淋巴因子的功能;

细胞毒性T细胞,具有杀伤靶细胞的功能;

记忆T细胞,有记忆特异性抗原刺激的作用.T细胞在体内存活的时间可数月至数年.其记忆细胞存活的时间则更长.

T细胞是淋巴细胞的一种,在免疫应答中扮演着重要的角色.

一般的来说高中生只用到效应T细胞和记忆T细胞.

B淋巴细胞

亦可简称B细胞.来源于骨髓的多能干细胞.在禽类是在法氏囊内发育生成,故又称囊依赖淋巴细胞(bursa

dependent

lymphocyte)/骨髓依赖性淋巴细胞简称B细胞,是由骨髓中的淋巴干细胞分化而来.与T淋巴细胞相比,它的体积略大.这种淋巴细胞受抗原刺激后,会增殖分化出大量浆细胞.浆细胞可合成和分泌抗体并在血液中循环.B细胞淋巴瘤是一种最常见的淋巴细胞白血病,有关这种疾病的研究不断涌现.在哺乳类是在类囊结构的骨髓等组织中发育的.又称骨髓依赖淋巴细胞.从骨髓来的干细胞或前B细胞,在迁入法氏囊或类囊器官后,逐步分化为有免疫潜能的B细胞.成熟的B细胞经外周血迁出,进入脾脏、淋巴结,主要分布于脾小结、脾索及淋巴小结、淋巴索及消化道粘膜下的淋巴小结中,受抗原刺激后,分化增殖为浆细胞,合成抗体,发挥体液免疫的功能.B细胞在骨髓和集合淋巴结中的数量较T细胞多,在血液和淋巴结中的数量比T细胞少,在胸导管中则更少,仅少数参加再循环.B细胞的细胞膜上有许多不同的标志,主要是表面抗原及表面受体.这些表面标志都是结合在细胞膜上的巨蛋白分子.B1细胞为T细胞非依赖性细胞.B2为T细胞依赖性细胞.B细胞在体内存活的时间较短,仅数天至数周,但其记忆细胞在体内可长期存在.

T淋巴细胞的免疫检测

T细胞分化抗原测定

【中文名称】

T细胞分化抗原测定

【概述】

T细胞膜表面有100多种特异性抗原,现已制备了多种单克隆抗体,WHO(1986)统称为白细胞分化抗原(cluster ,CD)。例如CD3代表总T细胞,CD4代表T辅助细胞(TH),CD8代表T细胞毒性细胞(TC)等。应用这些细胞的单克隆抗体与T细胞表面抗原结合后,再与荧光标记二抗(兔或羊抗鼠IgG)反应,在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数CD的百分率。

【参考值】

免疫荧光法(IFA):CD3为63.1%±10.8%;CD4(TH)为42.8%±9.5%;CD8(TS)为19.6%±5.9%;CD4/CD8(TH/TS)为(2.2±0.7)/1。流式细胞术:CD3为61%~85%;CD4为28%~58%;CD8为19%~48%;CD4/CD8为0.9~2.0/1。

【临床意义】

①CD3降低:见于自身免疫性疾病,如SLE、类风湿关节炎等。

②CD4降低:见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、应用免疫抑制剂者。

③CD8减低:见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病。

④CD4/CD8比值增高:见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病、病毒性感染、变态反应等;CD4/CD8比值减低:见于艾滋病(常<0.5)。

⑤监测器官移植排斥反应时CD4/CD8比值增高预示可能发生排斥反应。

⑥CD3、CD4、CD8较高且有CD1、CD2、CD5、CD7增高则可能为T细胞型急性淋巴细胞白血病。

T淋巴细胞和B淋巴细胞的免疫标志各是什么

  一、T淋巴细胞表面标志

  T细胞表面有许多膜分子,它们参与T细胞识别抗原,T细胞活化、增殖、分化及效应

  功能的发挥,其中有些膜分子还是区分T细胞及T细胞亚群的重要标志。包括TCR-CD3复合物、CD4和CD8分子、协同刺激分子受体、丝裂原受体及细胞因子的受体等。

  二、TCR 基因及TCR-CD3复合物

  TCR为T细胞抗原受体,为所有T细胞表面的特征性标志。TCR分为TCRαβ和TCRγδ

  两种类型,大多数T细胞表达TCRαβ。TCR的作用是识别抗原,但是它只能识别APC或靶

  细胞表面的抗原肽一MHC分子复合物,并且既识别抗原肽表位,也识别MHC分子。TCR两条肽链胞质区很短,不能传递信号,必须与CD3结合才能把TCR识别抗原所产生的活化信号由CD3分子转导到T细胞内部。

  一、B淋巴细胞的表面标志

  B细胞表面分子在抗原识别、细胞活化、增殖、产生抗体及提呈抗原给T细胞中发挥重

  要作用。B细胞表面分子包括BCR,CDl9和CD20,CD40,Fc受体,B细胞丝裂原受体等。BCR是B细胞的特有标志,是与抗原特异性结合的受体。CDl9/CD21/CD81作为B细胞的辅助受体,调节B细胞的活化。CD40是B表面的协同刺激分子,其配体为CD40L,两者的相互作用在B细胞分化成熟中起重要作用。B细胞表面有IgG的Fc受体Ⅱ,对抗体的产生和B细胞的功能有调节作用。B细胞有LPS、SPA、PWM的受体。B细胞在受到LPS等的刺激后可发生活化、增殖、分化,发生有丝分裂。

Th细胞的生物学标志

T细胞的标志:CD3肯定是阳性的,Th细胞CD4也是阳性。其他非特异标记,比如CD45也是阳性的。

辅助性T细胞是一种T细胞(白细胞的一种),它的表面有抗原接受器,可以辨识抗原呈献细胞的MHC Class II 分子呈献的抗原片段。辅助T细胞(helper T cell)在免疫反应中扮演中间过程的角色:它可以增生扩散来激活其它类型的产生直接免疫反应的免疫细胞。辅助T细胞的主要表面标志是CD4。

功能:

通过与MHCII(主要组织相容性复合体,major complex)递呈的多肽抗原反应被激活。MHCII在抗原递呈细胞(antigen presenting cells, APCs)表面表达。一旦激活,可以分泌细胞因子,调节或者协助免疫反应。

T细胞调控或“辅助”其它淋巴细胞发挥功能。它们是已知的HIV病毒的目标细胞,在艾滋病发病时会急剧减少。

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